科室讲座&丁香通公开课精彩回顾

我公司技术支持严君受丁香通邀请于今天下午14:30分联合丁香通开展了一堂在线公开课——原代细胞培养技术。

内容摘要：

（1）原代细胞培养技术原理介绍

（2）原代细胞培养实验步骤重难点讲解

（3）原代细胞培养实例剖析

公开课的提问环节非常火爆，在此我们也整理了一些问题供大家参考。

1神经干细胞在培养三四天后聚集成球后不再明显的增殖是什么原因？

有可能是换液不及时或者是加入的细胞因子剂量不对。

2神经干细胞在完全成球前可以换液吗？

可以换液，此细胞相对好养。

3取肝原代活细胞的活小鼠太小（7-8周）会不会有影响？

年龄越小分离的细胞活性会越好。

4.悬浮培养细胞早期半换液细胞流失太严重，可是如果采用离心，是否会对刚形成的神经球有很大的损伤？

离心之后弃上清加PBS重悬再离心，然后弃上清加培养液重悬，这样操作会好些。

5.怎么做pcr验证？

支原体的验证有很多成熟的商业化试剂盒，如果实验过程中多次出现怀疑支原体污染，可以买试剂盒检测。

6.如何从小鼠肺转移灶中分离出肿瘤细胞，及后续如何鉴定培养的细胞是所需的肿瘤细胞？

分离操作很简单，将病变组织取出，然后研磨收集细胞培养就可以了，研磨时力度要小；鉴定就需要查找一些针对性的标志物，进行流式或者组化鉴定。

7.淋巴团出现团块是什么问题？

一般是由于细胞状态不好，或是使用的血清、培养基不适合淋巴细胞的生长，细胞状态不好就会聚集成团。

8.关于黑胶虫？

如出现，检查培养箱及血清被污染的原因，大范围排除出污染的原因，将以前的细胞扔掉，彻底打扫实验室。

9原代细胞容易老化？

原代细胞培养过程中老化是很正常的情况，尽量取前面几代细胞进行实验再次分离。

本周二晚上7:00，我们的科室讲座在重庆市新桥医院神内科开展。为大家带来了精彩的ChIP染色质免疫共沉淀实验分享。

威斯腾生物致力于生命科学研究、产品开发和技术服务。在为广大的科研工作者提供专业服务的同时，更为了加强学术交流，推动科研发展，开展各种学术会议、讲座，为广大科研工作者提供技术支持。

从科室讲座到在线公开课，我们一直在努力，让大家感受威斯腾的魅力！

走进科室系列讲座十一场——CRISPR/Cas9技术应用与发展预告

主讲人：申友锋

高级工程师，CRISPR/Cas9项目组负责人，致力于基因靶向操作技术研究，参与国家重大科研项目“973”项目（转基因动物疾病模型研究），先后利用Talen技术成功敲除猪p53基因和敲除p53基因同时过表达H-ras+c-myc基因，成功构建出猪的肿瘤模型。加入威斯腾后，组建成立CRISPR/Cas9团队并担任负责人，利用CRISPR/Cas9基因敲除技术构建细胞、小鼠疾病模型及人类疾病治疗方面应用。

讲座内容摘要

（1）基因编辑技术简介

（2）构建细胞、动物模型应用

（3）新基因编辑工具Cpf1及Cas9比较

时间：2016年10月24日下午16：00——17:00

地点：重庆市新桥医院主病房7楼神经外科学习室