人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗血小板抗体IgG(PA-IgG)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)水平。用纯化的抗血小板抗体IgG(PA-IgG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入PA-IgG,再与HRP标记的抗血小板抗体IgG(PA-IgG)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PA-IgG呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人PA-IgG浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
说明书 |
1份 |
1份 |
|
封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
密封袋 |
1个 |
1个 |
|
酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
标准品:540 ng/ml |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔
地 址: 上海市杨浦区民京路658 联系人: 陈小姐 电 话: 13788942867 传 真: Email:13788942867@126.com,kanubio@126.com
[中科院]神经所研究揭示V4脑区对视觉运动信息的处理
(2013-05-03T10:22 浏览数:6101)
[中科院]广州地化所研究揭示洋脊俯冲对华北克拉通破坏的影响
(2013-05-03T10:20 浏览数:5456)
[癌细胞]:阿司匹林或降低女性患黑色素瘤风险
(2013-03-13T10:25 浏览数:5035)
[人类进化期刊]:古老型智人向早期现代人演化过渡研究获进展
(2013-03-13T10:24 浏览数:5455)
Science新闻:“10,000个癌症基因组计划”引高度关注
(2013-03-08T11:05 浏览数:5218)
五篇Science、Nature文章基因组编辑技术
(2013-03-08T11:04 浏览数:10619)
[美国流行病学期刊]:增加铁摄入量有助降低患经前综合征风险
(2013-03-05T13:16 浏览数:4485)
·PNAS:新模型可解释极端天气形成原因
(2013-03-05T13:15 浏览数:4795)
储成才研究员:从主粮进口看粮食安全
(2013-03-04T10:50 浏览数:4473)
科学家发现大脑信号能力决定快速约会对象
(2012-11-12T10:30 浏览数:6352)
上海卡努生物科技有限公司
商家主页
相关咨询