在后基因组时代，翻译后修饰（PTMs）逐渐成为揭示蛋白质功能多样性与调控机制的研究热点。酰基化（Acylation），尤其是乙酰化、丙酰化、丁酰化、马来酰化等多种形式，作为一类重要的赖氨酸修饰方式，广泛参与调控代谢、信号转导、染色质重构等关键生物过程。然而，这些修饰常常以低丰度、可逆性强、动态变化快为特征，给常规检测方法带来了挑战。定量蛋白质组学技术，尤其是结合免疫富集、液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）和稳定同位素标记策略，已成为研究不同条件下酰基化修饰变化的核心工具。

一、什么是酰基化？为何值得关注？

酰基化是指将不同类型的酰基基团（如乙酰、丙酰、丁酰等）共价连接到蛋白质赖氨酸残基上。以乙酰化为例，它不仅调控组蛋白的染色质结构变化，还广泛存在于代谢酶、转录因子、信号蛋白中：

• 调控蛋白活性：例如，乙酰化可抑制某些代谢酶的催化功能；
• 影响蛋白定位：酰基化可能决定蛋白是留在细胞核，还是转移至线粒体；
• 参与疾病机制：肿瘤、代谢综合征、神经退行性疾病等中常观察到异常酰基化图谱。

在不同的生理或病理条件下，酰基化的位点与程度可能发生显著变化。要精准捕捉这种差异，定量蛋白质组学技术无疑是最有效的手段。

二、如何开展酰基化差异的定量蛋白组学研究？

要系统研究不同处理条件（如药物刺激、缺氧、高糖、敲除模型等）下酰基化的变化，可采用以下经典技术路线：

1、样本准备与处理

（1）提取总蛋白，进行酶切（通常为胰蛋白酶）；

（2）使用特异性抗体富集酰基化肽段，如抗-乙酰赖氨酸抗体；

（3）采用SILAC、TMT/iTRAQ等稳定同位素标记技术，实现不同样本间的定量蛋白质组学对比；

（4）在复杂样本中也可选用无标记定量（Label-Free Quantification），适用于临床样本或难以标记的系统。

2、高分辨率LC-MS/MS检测

利用高分辨率Orbitrap或TOF质谱平台对富集后的酰基化肽段进行深入扫描分析。参数优化包括：

（1）使用HCD或ETD裂解模式，保留修饰信息；

（2）增加动态排除时间以提高低丰度肽段的检测机会；

（3）多级MS/MS（MS3）策略提升定量蛋白质组学分析的准确性。

3、数据分析与生物信息学挖掘

（1）利用如MaxQuant、Proteome Discoverer、Spectronaut等软件进行修饰位点鉴定；

（2）对比不同条件下的酰基化水平变化，筛选差异位点；

（3）富集分析通路（GO/KEGG）和蛋白互作网络（PPI）揭示其潜在生物学功能。

三、挑战与策略：提升酰基化定量的灵敏度与准确性

尽管目前蛋白组学技术已高度成熟，但酰基化修饰的定量仍面临如下挑战：

• 修饰丰度低，难以被检测到；
• 富集效率受抗体质量影响大；
• 异构修饰（如乙酰与丙酰）可能干扰位点判读。

应对策略包括：

• 严格优化富集流程，采用多轮免疫纯化；
• 搭配多种酰基化抗体进行平行检测；
• 引入DIA（数据独立采集）技术，提高覆盖率与定量蛋白质组学分析的重复性。

四、百泰派克生物科技：为您的酰基化蛋白组学研究保驾护航

在百泰派克生物科技，我们深知翻译后修饰研究对生命科学研究的重要性。我们提供：

• 专业的酰基化富集服务，涵盖乙酰、丙酰、丁酰等多种修饰；
• 多平台质谱检测能力（包括Orbitrap Exploris、timsTOF等）；
• 完整的数据分析报告，助力客户快速获得高价值科研发现。

我们已为多个科研机构和生物医药企业提供定制化蛋白修饰组学解决方案，广泛应用于代谢、免疫、肿瘤等研究领域。

酰基化作为一种关键的蛋白质翻译后修饰，在生命活动中发挥着深远的调控作用。利用先进的定量蛋白质组学方法，不仅可以系统描绘其在不同条件下的动态变化，还能为疾病机制研究、药物开发提供重要线索。如果您正在探索蛋白修饰领域的前沿问题，或面临酰基化研究中的技术难题，欢迎联系百泰派克生物科技，我们将以专业、高效、精准的科研服务助力您的创新研究。

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百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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