产品内容

名称         20ml                                Storage

试剂(A): X-Gluc Solution(50×) 400µL -20 ℃ 避光

试剂(B): GUS Buffer               20ml     4 ℃ 避光

X-Gluc（X-GlcA）分子量为 521.8，CAS 号为 18656-96-7，是检测大肠杆菌中 GUS 基因的底物，可快速检测植物中 GUS 基因融合标记。GUS 染色液在适宜的反应条件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc 水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有 GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS 染色液多用于转基因植物的 GUS基因表达分析。

操作步骤(仅供参考) ：
1、 配制 X- Gluc 染色液：取适量 X-Gluc Solution(50×)和 GUS Buffer，按 1:50 比例充分混匀，配制成X- Gluc 染色液，如取200ul X-Gluc Solution(50×)加入到10ml GUS Buffer中，即配成10ml GUS染色液，该染色液最好现配现用，短期可 4℃保存 3d。
2、 取适量待染液片等组织加入适量 GUS 染色液，使 GUS 染色液完全浸没组织。
3、 37℃孵育 1-24h。随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
4、 用 70%乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇 1-3h，至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微镜下观察，白色背景上的蓝色即为 GUS 表达位点。
注意事项：
1、 配制好的 GUS 染色液可以 4℃避光保存 3d。
2、 X-Gluc Solution(50×)应避免反复冻融，否则染色效率会下降。
3、 由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选真空渗入法来帮助底物渗入细胞,建议使用 GUS 染色液（G3060）。
4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。